小鼠心脏采血心得

       心脏穿刺采血是小鼠一次性大量采血的最佳方法，一次最多可以采0.8-1.1ml，但是新手上手失败率很高，我刚开始实验的时候几乎有50%的失败率，浪费了很多实验标本，每次采血心理压力都很大。最近通过摸索感觉已经突破瓶颈，最近两次实验的采血成功率达到90%，在这里把心得分享，希望实验新人能少走弯路。

     
       我原来尝试过的心脏穿刺方式：

1. 从胸壁垂直或倾斜45度进针：最早用的方法，靠手摸到心脏搏动最强点，但进针角度和深度不好把握，经常抽不出血，反复穿刺后发现心脏已经损伤，血液都流到胸腔里了，失败率很高。
2. 剪开胸壁直视下穿刺取血：直接看见心脏穿刺，看似很美好，但开胸太麻烦，还很容易剪破心脏大血管。
3. 剪开皮肤观察搏动点后穿刺：有助于找到心脏位置，但实际效果跟用手摸搏动点差别不大，失败率依旧很高。

       我现在采用剑突下倾斜10-20度进针穿刺，成功率高，适合像我这样的实验新手。

       将麻醉后的小鼠固定好，我的方法是把泡沫板挖条凹槽，让小鼠仰卧在里面，肯定还有更好的方法，比如用大头针固定四肢，越是新手越需要固定牢靠。

       左手轻轻捏住小鼠腹部皮肤，作为着力点，右手持1ml注射器，针尖斜面朝上，从剑突与左肋弓的交界处刺入，与腹部约呈20度夹角，一直向上插入，心脏就在这条直线上，整根针头几乎全部进入体内后，稍抽针芯，给予一点负压，观察有无血液流入注射器，如果没有则保持负压稍稍向后退针，通常此时可见血液流入注射器。见血后保持注射器位置不动，匀速向后抽注射器，保持枕芯与血液平面差距大约0.1ml距离，即有一定的负压，直至抽完。

       如果退针时仍无血液流出，不要变换方向反复刺入，这样很容易损伤心脏，导致小鼠死亡或大出血，而应当把针完全退出，重新确认小鼠身体没有扭曲或歪斜，再次按原方法尝试穿刺。

      更全面的小鼠采血文献：http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/summary?doi=10.1.1.174.5448